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共聚焦荧光显微镜,求助有关荧光共聚焦显微镜的使用

来源:整理 时间:2023-08-29 05:37:30 编辑:智能门户 手机版

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1,求助有关荧光共聚焦显微镜的使用

激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscopeCLSM)近代先进细胞物医析仪器目前激光扫描共聚焦显微技术已用于细胞形态定位、立体结构重组、态变化程等研究并提供定量荧光测定、定量图像析等实用研究手段结合其相关物技术形态、理、。

求助有关荧光共聚焦显微镜的使用

2,共聚焦显微镜的基本原理

传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共聚焦显微镜利用激光束经照明针孔形成点光源对标本内焦平面的每一点扫描,标本上的被照射点,在探测针孔处成像,由探测针孔后的光电倍增管(PMT)或冷电耦器件(cCCD)逐点或逐线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点不会在探测针孔处成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学横断面,克服了普通显微镜图像模糊的缺点。

共聚焦显微镜的基本原理

3,激光共聚焦显微镜对载体表面荧光标记蛋白质能定量吗

坦白的讲,以我对共聚焦荧光显微镜的了解,只能对荧光强度定性,不能定量。因为调焦是人为控制的,手动调焦需要人的眼睛来判断焦距是否调的很好,而这是不可能实现在相同条件下的荧光记录和分析的,焦距的微小改变能够很大程度上影响荧光强度的变化。所以,这并非造假,而是实验设计本身的特点所决定的。文献中的定量分析,个人认为需要有折扣的相信。另外,荧光定量分析最准确的方法是流式细胞仪分析。
a、利用荧光标记特定的抗体,a错误;b、可以将与染色体特异性结合的抗体用荧光标记,来跟踪染色体,进而观察活细胞有丝分裂过程中染色体的行为变化,b正确;c、只有动物细胞能产生抗体,因此利用标记的抗体不能研究植物的光合作用过程,c错误;d、利用标记的氨基酸分子可观察分泌性蛋白的合成和分泌过程,d错误.故选:b.

激光共聚焦显微镜对载体表面荧光标记蛋白质能定量吗

4,倒置荧光显微镜与激光共聚焦显微镜有什么区别

荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别激光共聚焦显微镜是采用激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。主要系统包括激光光源、自动显微镜、扫描模块(包括共聚焦光路通道和针孔、扫描镜、检测器)、数字信号处理器、计算机以及图象输出设备(显示器、彩色打印机)等。通过激光扫描共聚焦显微镜,可以对观察样品进行断层扫描和成像。因此,可以无损伤的观察和分析细胞的三维空间结构。同时,通过激光扫描共聚焦显微镜也是活细胞的动态观察、多重免疫荧光标记和离子荧光标记观察的有力工具.精确地对光谱的本质进行分析,区分发射光谱高度重叠的不同标记的信号。最重要的是,对于多色的荧光染色,它能彻底消除了荧光串色的影响,同时最大限度的减少了样品荧光信号的损失。这些都是一般光镜所不能达到的。

5,共焦荧光显微镜和多光子荧光显微镜的不同

首先光源不同,一个是激光,一个是紫外或其他光照射产生的荧光。两外,观察方式不同,激光共聚焦是激光投射扫描;荧光是受激发产生的,光源可以在载物台上方,也可以在载物台下方。最后,制片方式也不同,激光共聚焦制片简单;荧光制片麻烦。----午禾科技
激光共聚焦显微镜是采用激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。主要系统包括激光光源、自动显微镜、扫描模块(包括共聚焦光路通道和针孔、扫描镜、检测器)、数字信号处理器、计算机以及图象输出设备(显示器、彩色打印机)等。通过激光扫描共聚焦显微镜,可以对观察样品进行断层扫描和成像。因此,可以无损伤的观察和分析细胞的三维空间结构。同时,通过激光扫描共聚焦显微镜也是活细胞的动态观察、多重免疫荧光标记和离子荧光标记观察的有力工具.精确地对光谱的本质进行分析,区分发射光谱高度重叠的不同标记的信号。最重要的是,对于多色的荧光染色,它能彻底消除了荧光串色的影响,同时最大限度的减少了样品荧光信号的损失。这些都是一般光镜所不能达到的。

6,共聚焦荧光显微镜观察钙黄绿素和四环素的激发波长和发射波长是多少

两者在工作原理及应用方面存在不同。分述如下:一、荧光显微镜1、荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。2、荧光显微镜原理:(A) 光源:光源辐射出各种波长的光(以紫外至红外)。(B) 激励滤光源:透过能使标本产生萤光的特定波长的光,同时阻挡对激发萤光无用的光。(C) 荧光标本:一般用荧光色素染色。(D) 阻挡滤光镜:阻挡掉没有被标本吸收的激发光有选择地透射荧光,在荧光中也有部分波长被选择透过。  以紫外线为光源,使被照射的物体发出荧光的显微镜。电子显微镜是在1931年在德国柏林由克诺尔和哈罗斯卡首先装配完成的。这种显微镜用高速电子束代替光束。由于电子流的波长比光波短得多,所以电子显微镜的放大倍数可达80万倍,分辨的最小极限达0.2纳米。1963年开始使用的扫描电子显微镜更可使人看到物体表面的微小结构。3、应用范围:用来放大微小物体的图像。一般应用于对生物、医药、微观粒子等观测。二、共焦显微镜1、共焦显微镜在反射光的光路上加上了一块半反半透镜,将已经通过透镜的反射光折向其它方向,在其焦点上有一个带有针孔的挡板,小孔就位于焦点处,挡板后面是一个 光电倍增管。可以想像,探测光焦点前后的反射光通过这一套共焦系统,必不能聚焦到小孔上,会被挡板挡住。于是光度计测量的就是焦点处的反射光强度。2、原理:传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共聚焦显微镜利用激光束经照明针孔形成点光源对标本内焦平面的每一点扫描,标本上的被照射点,在探测针孔处成像,由探测针孔后的光电倍增管(PMT)或冷电耦器件(cCCD)逐点或逐线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点不会在探测针孔处成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学横断面,克服了普通显微镜图像模糊的缺点。3、应用领域: 涉及医学、动植物科研、生物化学、细菌学、细胞生物学、组织胚胎、食品科学、遗传、药理、生理、光学、病理、植物学、神经科学、海洋生物学、材料学、电子科学、力学、石油地质学、矿产学。
文章TAG:共聚焦荧光显微镜求助有关荧光共聚焦显微镜的使用

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